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土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒（VW13, 50T/24S）說明書
測定意義：
土壤總磷包括有機磷和無機磷，其中無機磷能夠直接被植物利用。土壤有機磷經(jīng)過礦化分解
而轉(zhuǎn)化為無機磷。同時測定土壤總磷、有機磷和無機磷，可以全面反映土壤磷營養(yǎng)狀況。
測定原理：
利用鉬藍法定磷。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機磷含量；另外取一份土樣，經(jīng)高溫
灼燒后，土壤有機磷轉(zhuǎn)化為無機磷，測得土壤總磷含量；總磷含量減去無機磷含量，即可計
算出有機磷含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式水浴鍋，分析天平、可調(diào)式移液器、550℃高溫電爐，
1mL 玻璃比色皿、蒸餾水、100 目篩子（可更?。?。

土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存。臨用前用蒸餾水稀釋10 倍后再用。
試劑二：液體×1 瓶，4℃保存。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入20 mL 蒸餾水，充分溶解后加入10 mL
試劑二，混勻。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20 μ mol/L 無機磷標(biāo)準(zhǔn)品，4℃保存。
土壤不同形態(tài)磷提取：
1.無機磷：稱取通過100 目篩子的風(fēng)干土樣0.1g，轉(zhuǎn)移到10 mL 離心管，加入10mL 試劑一，
震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，取上清液一，用于無機磷含量測
定。
2.總磷提?。喝⊥ㄟ^100 目篩子的風(fēng)干土樣，550℃灼燒1h，冷卻后稱取約0.1g，轉(zhuǎn)移到10
mL 離心管，加入10mL 試劑一，震蕩混勻，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，離心10min，
取上清液二，用于總磷含量測定。
測定步驟：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min 以上，調(diào)節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調(diào)零。
2.打開水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。
3. 空白管：取EP 管，依次加入500μL 蒸餾水，500μL 試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫
10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測定吸光度，記為A 空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管，依次加入50μL 標(biāo)準(zhǔn)液，450μL 蒸餾水，500μL 試劑三，混勻后置于
40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測定管：取EP 管，依次加入50μL 上清液一或者上清液二，450μL 蒸餾水，500μL 試劑
三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min 后于660 nm 測定吸光度，記為A
測定管。
土壤磷含量計算：
1.土壤無機磷含量（μmol /g）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V
總÷W=0.2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L； W：土壤樣品質(zhì)量，g； V 總：上清液一總體積，10 mL=0.01 L。
2.土壤總磷含量（μmol /g）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總
÷W=0.2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L；V 標(biāo)準(zhǔn)液：50μL=0.05 mL；W：土壤樣品質(zhì)量，g；V 總：上清液二
總體積，10 mL=0.01 L。
3. 土壤有機磷（μmol /g）=土壤總磷-土壤無機磷

土壤總磷/有機磷/無機磷含量測定試劑盒